KRAS mutation screening by chip-based DNA hybridization – a further step towards personalized oncology

in: Analyst (2015)
Steinbach, Christine; Steinbrücker, Carolin; Pollok, Sibyll; Walther, Katharina; Clement, Joachim H.; Chen, Yuan; Petersen, Iver; Cialla-May, Dana; Popp, Jürgen; Weber, Karina
The use of predictive biomarkers can help to improve therapeutic options for the individual cancerpatient. For the treatment of colon cancer patients with anti-EGFR-based drugs, the KRAS mutation statushas to be determined to pre-select responders that will benefit from this medication. Amongst others,array-based tests have been established for profiling of the KRAS mutation status. Within this article wedescribe an on-chip hybridization technique to screen therapeutic relevant KRAS codon 12 mutations.The DNA chip-based platform enables the reliable discrimination of selected mutations by allele-specifichybridization. Here, silver deposits represent robust endpoint signals that allow for a simple naked eyerating. With the here presented assay concept a precise identification of heterozygous and homozygousKRAS mutations, even against a background of up to 95% wild-type DNA, was realizable. The applicabilityof the test was successfully proven for various cancer cell lines as well as clinical tumour samples. Thus,the chip-based DNA hybridization technique seems to be a promising tool for KRAS mutation analysis tofurther improve personalized cancer treatment.

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